Meios de Cultura

Meios de transporte

Meios destinados à preservação de microrganismos presentes em materiais biológicos. Os meios são acompanhados de swabs bacteriológicos com algodão destituídos de propriedades bactericidas, tratados com soluções tamponantes visando a coleta, transporte e conservação de amostras biológicas.

Cód. 02-01 > M.I.F. modificado

Finalidade Þ Solução conservadora de fezes destinada a amostras de parasitologia para preservação de ovos , cistos e trofozoítos.
Apresentação: Frascos com 1.000 ml. Validade = 12 meses

Cód. 02-02 > TRANSPROV I - Cary Blair com swab

Finalidade > Meio de cultura destinado ao transporte dos mais variados materiais biológicos principalmente para amostras de fezes. Sendo muito importante pois permite a conservação do Vibrio cholerae. Os outros meios de transporte como a glicerina tamponada inviabilizam este patógeno.
Apresentação: Caixa com 50 tubos e 50 swabs bacteriológicos individualmente embalados. Validade = 6 meses

Cód. 02-03 Þ TRANSPROV II - Cary Blair em coletor c/ pazinha

Finalidade Þ Meio de cultura destinado ao transporte dos mais variados materiais biológicos principalmente para amostras de fezes. Sendo muito importante pois permite a conservação do Vibrio cholerae. Os outros meios de transporte como a glicerina tamponada inviabilizam este patógeno.

Apresentação: 12 frascos com 12 pazinhas. Validade = 6 meses

Cód. 02-04 Þ TRANSPROV III - Stuart com swab

Finalidade Þ Meio de cultura com composição definida de baixo potencial de oxiredução destinado a preservação de bactérias, fungos ou parasitas, nos mais variados materiais biológicos. É um dos meios de transporte mais utilizados internacionalmente.
Apresentação: Caixa com 50 tubos e 50 swabs bacteriológicos individualmente embalados. Validade= 10 meses

Cód. 02-05 Þ TRANSPROV IV - M.I.F. com pazinha

Finalidade Þ M.I.F. contendo pazinha para melhor coleta da amostra.
Apresentação: Caixa com 12 frascos. Validade = 6 meses

Cód. 02-06 Þ TRANSPROV V

Finalidade Þ Solução salina glicerinada tamponada, visando o transporte e conservação dos mais variados patógenos intestinais. As fezes podem permanecer em temperatura ambiente por até 24 horas. Não recomendado para Vibrio cholerae; Ideal para Shigella.
Apresentação: Caixa com 12 frascos. Validade = 6 meses

Meios de cultura em placas e frascos

Meios estéreis distribuídos em placas de Petri. Cada pacote contém 10 placas. São destinados ao isolamento de colônias. Os meios de cultura acondicionados em tubo não possuem esta finalidade, destinam-se ao estudo de determinadas características bioquímicas.
Apresentação: Pacote com 10 placas. Validade = 2 meses
Armazenamento Þ Entre +4 e +8ºC, longe do congelador e ao abrigo da luz.

Esta forma de acondicionamento visa maior durabilidade. Para serem utilizados devem ser aquecidos em banho-maria fervente por 5 minutos, observando sempre contra a luz, se está totalmente dissolvido. Após este procedimento, deve ser distribuído assepticamente em tubo ou placa. Possui vantagens como não sofrer alterações por ser hermeticamente fechado, dispensar a autoclavação e possuir um prazo de validade longo.
Apresentação: Frasco com 100ml. Validade = 18 meses
Armazenamento Þ Deve ser mantido ao abrigo da luz, em local fresco.

Para Gram negativos

Finalidade Þ Meio seletivo diferencial de média seletividade, sendo excelente para o isolamento de Salmonella e Shigella. Além de permitir a leitura de fermentação de açúcares como sacarose, lactose e salicina, também fornece leitura de produção de H₂S. As Salmonelas utilizam este substrato, formando colônias com centro preto, sendo esta uma conduta no procedimento de escolha das colônias, visando o diagnóstico de Salmonella. A maioria das colônias de E. coli, Enterobacter, Klebsiella, são inibidas neste meio de cultura. As colônias de Shigella se apresentam verde azuladas, e as de Salmonella, verde azuladas com centro preto.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-06. Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml - Código 06 –02. Validade = 18 meses

Finalidade Þ Ágar seletivo de escolha para o isolamento de Gram negativos. Meio diferencial pois propicia a visualização de colônias fermentadoras ou não da lactose. As colônias vermelhas são consideradas lactose positiva e as claras, lactose negativa. São utilizados sais biliares com cristal violeta como agentes inibidores e vermelho neutro em conjunto como indicadores.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-08.
Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml. Validade = 18 meses

Finalidade Þ Meio de alta seletividade destinado à coprocultura, visando o isolamento de Salmonella e Shigella. Possui as mesmas finalidades do meio de Hektoen e XLD, propiciando também a leitura de produção de H₂S. Possui sais biliares como agente inibidor. As colônias suspeitas de Shiguela são transparentes e as de Salmonella se apresentam transparentes e geralmente com centro negro.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-13.
Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml - Código 06-06Validade = 18 meses

Finalidade Þ Meio de cultura de baixa seletividade destinado ao isolamento de Gram negativos como o meio de MacConkey. As colônias fermentadoras de lactose apresentam coloração preta, com ou sem brilho metálico. As não fermentadoras de lactose, como as Salmonella e Shigella, apresentam-se incolores.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-14
Validade = 2 meses

Finalidade Þ Meio de cultura de média seletividade utilizado para coprocultura. Possui xilose, lactose, sacarose e lisina, e propicia a visualização da produção de H₂S. As colônias de Salmonella se apresentam vermelhas com o centro preto, as de Shigella, vermelhas. Bactérias como E. coli produzem colônias amarelas. O inibidor utilizado é o desoxicolato de sódio.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-16.
Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml - Código 06-07. Validade = 18 meses

Para estafilococos

Finalidade Þ Meio seletivo para o isolamento de estafilococos, como o ágar Chapman. Além da alta concentração de cloreto de sódio, possui também manitol, sendo este um substrato importante na classificação de estafilococos. Colônias amarelas indicam a utilização do manitol. (Suspeita de S. aureus).
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-09
Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml - Código 06-04. Validade = 18 meses

Para urocultura

Ágar CLED

Finalidade Þ Meio não seletivo, apenas diferencial. Contém lactose. Destinado ao isolamento de Gram positivos e Gram negativos em urina. É um meio de cultura eletrólito-deficiente, impedindo o "swarming" do Proteus. Utilizando-se uma alça calibrada de 1m l ou 10m l é possível realizar a contagem de colônias.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-03.
Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml - Código 06-01. Validade = 18 meses

Cód. 03-04 Þ Ágar CLED/Ágar CLED (Biplaca)

Finalidade Meio não seletivo, apenas diferencial. Contém lactose. Destinado ao isolamento de Gram positivos e Gram negativos em urina. É um meio de cultura eletrólito – deficiente, impedindo o "swarming" do Proteus.
Apresentação: Pacote com 10 biplacas. Validade = 2 meses

Cód. 03-05 Þ URIPROV: CLED/Mac Conkey - (Biplaca)

Finalidade Þ Placa que contém os dois meios já descritos anteriormente (cód. 03-03 e 03-08). Destinados à urocultura, sendo que no meio de CLED visualiza-se o desenvolvimento de germes Gram positivos e Gram negativos. No Ágar Mac Conkey se desenvolvem somente Gram negativos (a grande maioria dos uropatógenos).

Apresentação: Pacote com 10 biplacas. Validade = 2 meses

Para neisseria

Cód. Þ 03-01 - Ágar Chocolate/Thayer Martin (Biplaca)

Finalidade Þ Metade da placa contém Ágar Chocolate adicionado de suplementos vitamínicos e minerais, destinados ao isolamento de bactérias exigentes como as do gênero Neisseria, e a outra metade o meio de Thayer Martin (Ágar Chocolate Suplementado acrescido de Vancomicina, Colistin e Nistatina, destinados à inibição de contaminantes existentes em materiais onde se pesquisa gonococos).
Apresentação: Pacote com 10 biplacas. Validade = 2 meses

Cód. 04-10 Þ Thayer Martin

Finalidade Þ Ágar Chocolate enriquecido de suplemento VX, com adição de Colistin (inibição de Gram negativos), Vancomicina (inibição de Gram positivos) e Nistatina (inibidor de crescimento de fungos). Este meio deve ser incubado com a tampa frouxa, na vertical, em recipiente contendo 5 a 10% de CO₂. Meio destinado ao isolamento de bactérias do gênero Neisseria. Possui durabilidade limitada devido à presença de antibióticos.
Apresentação: Caixa com 8 tubos. Validade = 6 meses

Para microorganismos exigentes

Finalidade Þ Ágar Chocolate com uma base rica, acrescido de 7% de sangue de carneiro e suplemento VX, destinado ao enriquecimento, visando o isolamento de Neisseria, Hemófilos, Brucelas e outros germes exigentes.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-02.
Validade = 2 meses
Caixa com 8 tubos - Código: 04 -02. Validade = 10 meses

Para antibiograma

Finalidade Þ Ágar internacional de escolha para a realização do antibiograma (teste de susceptibilidade a antimicrobianos). É um meio que possui eletrólitos em concentrações padronizadas, de composição química definida, não apresentando substâncias antagônicas às sulfas e antibióticos, visando a execução de testes de susceptibilidade a antimicrobianos.

É o meio padrão recomendado pela Organização Mundial de Saúde (OMS) e FDA.
Apresentação: Pacote com 10 placas 150 x 15 mm sob o Cód. 03-11 Validade = 2 meses.
Pacote com 10 placas 90 x 15 mm sob o Cód. 03-10
Validade = 2 meses
Frasco com 100 ml sob o Cód. 06-05. Validade = 18 meses

Para estreptococos

Finalidade Þ Meio de cultura de base rica. Geralmente utiliza-se Ágar Mueller Hinton ou Ágar Columbia como base deste meio, sem glicose, pois esta poderia atrapalhar a visualização de hemólise. Acrescido de 7% de sangue de carneiro desfibrinado. Excelente meio para o isolamento de estreptococos beta-hemolíticos, principalmente a nível de orofaringe. É um meio amplo, pois praticamente todas as bactérias facultativas conseguem se desenvolver neste meio.
Apresentação: Pacote com 10 placas - Código: 03-1.
Validade = 2 meses.
Caixa com 8 tubos - Código: 04-09. Validade = 6 meses

Uso geral (gram positivos e gram negativos)

Cód. 03-15 Þ Ágar Tríptico de Soja (TSA)

Finalidade Þ Meio de cultura de amplo crescimento, não seletivo, não diferencial, servindo para o isolamento e contagem dos mais variados microorganismos facultativos.
Apresentação: Pacote com 10 placas. Validade = 2 meses

Meios de cultura em tubos

Disponíveis em tubos de maior e menor calibre. Os menores são fornecidos em caixas com 10 unidades e geralmente são destinados à leitura de provas bioquímicas. Os tubos de maior calibre possuem a finalidade de isolamento e são acondicionados em caixas com 8 tubos. Nesta forma de acondicionamento a durabilidade do meio é significativamente superior, em relação aos meios de cultura em placa. A vedação do tubo propicia uma maior durabilidade e proteção do meio contra eventuais contaminações. Meios de cultura em tubos não são indicados para se trabalhar com amostras contaminadas e/ou amostras com flora polimicrobiana e quando necessita - se obter colônias isoladas.
Armazenamento: Entre +4 e +8ºC, longe do congelador e ao abrigo da luz.

Para enterococos

Cód. 04-01 Þ Bile Esculina - Ágar

Finalidade Þ Meio de cultura para enterococos, destinado à verificação da tolerância a 40% de bile e hidrólise da esculina. A reação positiva corresponde ao enegrecimento do meio.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-31 Þ M.T.S. (Meio de Tolerância ao Sal)

Finalidade Þ Caldo com 6,5% de cloreto de sódio e indicador de pH, utilizado na identificação de enterococos. O enterococo cresce neste meio, turvando e acidificando. É utilizado a púrpura de bromocresol como indicador. Apresenta-se amarelado quando ocorre o crescimento. Este meio é utilizado juntamente com o meio de bile esculina para identificação presuntuiva de enterococo.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Para gram negativos

Cód. 04-03 Þ Citrato de Simmons - Ágar (Kit nº 4)

Finalidade Þ Meio utilizado para verificar se a enterobactéria cresce ou não em meio pobre contendo como única fonte de carbono o citrato de sódio. Em caso de positividade desta prova, há o desenvolvimento da bactéria ou o meio torna – se azulado.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-04 Þ Fenilalanina - Ágar

Finalidade Þ Meio utilizado para verificar se a bactéria produz a desaminação da fenilalanina. Deve ser incubado com a tampa frouxa. Após o crescimento adiciona-se gotas de solução de cloreto férrico a 10%. O imediato aparecimento de coloração verde-azulada significa prova positiva. Cuidar pois a coloração desaparece espontaneamente.
Apresentação: Caixa com 10 tubos.Validade = 10 meses

Cód. 04-29 M.I.L.i

Finalidade Þ Meio que fornece leitura de motilidade, indol e lisina. Possui coloração violeta, visa verificar se a bactéria produz indol, se descarboxila lisina e se é móvel ou não.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-33 Þ MR-VP (Clark Lubs)

Finalidade Þ Meio que pode ser utilizado para as provas de VP e VM. Destina-se a verificar se o bacilo Gram negativo, ou até mesmo cocos Gram Positivos produzem ou não acetoína. Para pesquisa de VP adiciona-se, após o crescimento, a -naftol e KOH. Para a pesquisa de VM acrescenta-se vermelho de metila ao meio.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-07 Þ OF Glicose - Ágar

Finalidade Þ Ágar de coloração verde, possui azul de bromotimol como indicador, destinado a verificar o comportamento da bactéria frente a esse açúcar, se oxida, se fermenta ou se é inerte. Muito utilizado principalmente em pesquisa de Pseudomonas spp, ou germes semelhantes. A prova é realizada com dois tubos ou até mesmo três, sendo que um deve ser vedado com óleo mineral estéril e outro deve permanecer aberto. Para interpretação observa se ocorreu a acidificação do tubo aberto (bactéria oxidativa). Se o microrganismo é capaz de fermentar em tubo fechado, a bactéria pertence ao grupo das fermentadoras, e quando o germe não acidifica nenhum dos tubos é classificado como inerte. Observa-se para Pseudomonas aeruginosa, a oxidação da glicose (coloração amarela no ápice do tubo aberto).
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-19 Þ Púrpura de Bromocresol – Caldo

Finalidade Þ Meio destinado a estudos de utilização de açucares ou aminoácidos. Adiciona-se o substrato desejado em concentração e observa-se ou não a mudança da coloração inicial. A reação final positiva com açucares é de cor amarela, com aminoácidos é qualquer cor diferente do amarelo.
Apresentação: Caixa com 08 tubos. Validade = 10 meses

Finalidade Þ Meio de composição complexa, de difícil interpretação. No tubo existe a possibilidade de se verificar a desaminação do l-triptofano, produção de indol, fermentação de sacarose, fermentação da glicose, hidrólise de uréia, produção de gás, de H₂S, descarboxilação de lisina e motilidade. É um meio que deve ser utilizado com bastante cuidado e critério, pois com todos esses substratos juntos podem haver interferências e determinadas leituras serem comprometidas. Na parte superior do tubo, acha - se o meio de Rugai, separado por uma interfase que é cera de carnaúba e vaselina, tendo na parte inferior do tubo o meio de lisina/motilidade.
Apresentação: Caixa com 10 tubos = Código: 04-34.
Validade = 3 meses.
Caixa com 50 tubos = Código 04-35. Validade = 3 meses.

Cód. 04-11 Þ T.S.I. (Tríplice Açúcar com Ferro)

Finalidade Þ Ágar internacionalmente preconizado para identificação de Gram negativos. Possui coloração vermelha, apresenta-se na forma inclinada com pico de flauta. Propicia a verificação da fermentação da glicose pela bactéria, conferindo coloração amarela na base, (reação positiva para glicose). Caso haja fermentação da lactose e/ou sacarose a colocação da parte superior do tubo será o amarelo. Quando estes dois açúcares não são fermentados a ápice permanece com a cor original (vermelha). Pode também ser visualizada a produção de CO₂ e H₂S. Utilizado como meio de triagem bioquímica. Por possuir apenas quatro leituras, é um meio considerado sem tanta eficiência como o meio de EPM. Microoganismos como: Proteus, Citrobacter e Salmonella podem apresentar o mesmo aspecto. Para uma melhor eficiência deve-se acoplar outras provas bioquímicas. Recomenda-se sua utilização para BGN oxidases negativos.(especialmente Enterobactérias).
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-24 Þ Uréia-Indol - Caldo

Finalidade Þ Caldo destinado à identificação bioquímica de Enterobactérias. Para verificar o indol basta acrescentar o reativo de Kovacs ou reativo de Erlich. A hidrólise da uréia pode ser verificada pelo aumento do pH (alcalinização). O meio original apresenta coloração laranja.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Meios de enriquecimento para coprocultura

Cód. 04-14 Þ G.N.- Caldo

Finalidade Þ Caldo destinado ao enriquecimento seletivo de fezes, visando o enriquecimento de Salmonella e Shigella. O grande cuidado a ser observado se refere ao tempo de incubação. Não deve ser inferior a 4 horas ou superior a 6 horas, pois após este tempo o enriquecimento passa a não ser seletivo.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-21 Þ Selenito - Caldo

Finalidade Þ Meio seletivo para Salmonella e Shigella, destinado ao enriquecimento de coprocultura. Possui a desvantagem de propiciar o aumento da concentração de Proteus, bactéria sem interesse em coprocultura e também pode inibir algumas cepas de Shigella, Recomenda-se o uso do caldo G.N. já descrito anteriormente. Incubação de 8 a 12 horas.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Uso geral

Cód. 04-13 Þ B.H.I.(Infusão de Cérebro e Coração) - Caldo

Finalidade Þ Caldo destinado ao enriquecimento de amostras em geral, propiciando o crescimento das mais diversas bactérias utilizado para o enriquecimento de amostras obtidas de secreção ocular ou bactérias conservadas em ágar

(ex: cepas ATCC)

Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-18 Þ Mueller Hinton - Caldo

Finalidade Þ Caldo rico de amplo crescimento bacteriano, utilizado para aumentar o inóculo bacteriano, visando antibiograma ou enriquecimento de microrganismos nos mais diversos materiais biológicos.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-22 Þ Caldo Tioglicolato (sem indicador)

Finalidade Þ Meio de baixo potencial de oxiredução, que visa o enriquecimento de amostras contendo germes exigentes ou não. É recomendado também para germes anaeróbios.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-23 Þ Caldo T.S.B. (Triptico de Soja)

Finalidade Þ Meio amplo utilizado para aumentar o inóculo bacteriano, proveniente dos mais variados materiais.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

 KIT PARA ENTEROBACTÉRIAS

 MINI-KIT PARA ENTEROBACTÉRIAS

 MANUAL PARA IDENTIFICAÇÃO

(Kits contendo meios de cultura para identificação de Enterobactérias)

INFORMAÇÕES TÉCNICAS

Princípios

O diagnóstico laboratorial dos bacilos Gram negativos fermentadores de glicose se baseia principalmente na identificação de enterobactérias. O isolamento de BGN que não reage à oxidase não oferece muita dificuldade quando estamos diante de cepas bioquimicamente típicas. O desenvolvimento da Bacteriologia Clínica tem forçado uma melhor identificação dos microrganismos que não possuem um perfil bioquímico clássico, ou seja, não apresentam reações típicas a várias provas em questão. Exemplos clássicos são as cepas de Escherichia coli produtoras de gás sulfídrico ou ainda as de Salmonella fermentadoras de lactose. Nestes casos recomenda-se o uso de sistemas de identificação bioquímica mais completo. Este kit é especialmente indicado para bacilos Gram negativos atípicos, que constituem em grande parte a flora bacteriana isolada em pacientes hospitalizados, muitas vezes implicados em casos de infecções hospitalares. As Enterobactérias típicas também são facilmente identificadas por este sistema.

O kit é composto de cinco tubos com os seguintes meios: Meio de EPM, Meio de Lisina, Meio de MIO, Meio de Rhamnose e Meio de Citrato de Simmons com funções determinadas, conforme descrito abaixo:

Cód. 04-27 Þ Tubo nº 1 - Meio de E.P.M. (cor verde) com tampa incolor

Finalidade Þ Permite a leitura de LTD, Glicose, Gás e H₂S. O LTD (desaminação de L-triptofano) é evidenciado pela cor verde garrafa escura no ápice do tubo, sendo importante para verificar se a bactéria pertence ao gênero Proteus ou Providencia. A leitura da glicose pela coloração amarela da base do tubo, com ou sem produção de gás evidenciado pelo arrebentamento do meio ou a presença de bolhas. A produção de gás sulfídrico pela presença de cor negra. A prova de hidrólise da uréia foi retirada do meio, com a finalidade de otimizar o seu uso.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-17 Þ Tubo nº 2 - Meio de Lisina (cor violeta) - com tampa branca

Finalidade Þ Permite a leitura da descarboxila da L-Lisina. A cor amarela relata a reação negativa e qualquer cor diferente de amarelo é considerado positivo. Deve-se salientar que é um dos poucos meios que quando ocorre uma mudança efetiva de coloração, a prova é negativa.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-30 Þ Tubo nº 3 - Meio de M.I.O. (cor violeta) com tampa vermelha

Finalidade Þ Permite a leitura de Motilidade, descarboxilação da Ornitina e produção de Indol. A motilidade é observada pela turvação do meio. Se houver crescimento somente na picada a prova é considerada negativa. A interpretação da Ornitina (observada no fundo do tubo) é semelhante à Lisina, ou seja, cor amarela indica prova negativa e qualquer outra cor é considerado positiva. O Indol é revelado pelo acréscimo do reativo de Kovacs. A formação de anel de cor vermelha significa a produção de Indol, portanto a prova é positiva.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-03 Þ Tubo nº 4 - Meio de Citrato de Simmons (cor verde) - com tampa preta

Finalidade Þ Responsável pela leitura do citrato, prova de utilização do substrato. Verifica se a bactéria cresce ou não em meio pobre, contendo como única fonte de carbono o citrato de sódio. Meio de cor original verde, tornando-se azul em caso de prova positiva e, permanecendo verde para provas negativas. O crescimento sem viragem de cor, deve ser analisado cuidadosamente, pois, pode se tratar de prova positiva.
Deve-se cuidar para que seja colocado pouco material neste meio, assim como também evitar arrastar nutrientes do meio original com alça, uma vez que estes nutrientes podem dar uma reação falso positiva.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04-20 Þ Tubo nº 5 - Meio de Rhamnose (cor verde) - com tampa branca

Finalidade Þ Permite verificar se o bacilo de Gram negativo fermenta ou não este açúcar. Meio com cor original verde, tornando-se amarelo em caso de prova positiva e permanecendo verde para provas negativas. Mesmo permanecendo verde o meio deve turvar, indicando portanto que houve inóculo suficiente para esta prova.
Apresentação: Caixa com 10 tubos. Validade = 10 meses

Inoculação

Escolher uma colônia isolada e com auxílio de agulha bacteriológica flambada com a extremidade dobrada, recolher metade desta colônia.
Inocular no primeiro tubo por picada e estria na superfície, deixando a tampa do tubo frouxa.
Sem flambar semear, no segundo tubo na superfície, selando com óleo mineral estéril e fechando bem a tampa do tubo.
Ainda sem flambar, semear o terceiro tubo com picada central única, deixando a tampa do tubo frouxa.
Recolher a outra metade da colônia, semear no quinto tubo através de dissolução, devendo ser selado com óleo mineral estéril e a tampa do tubo bem fechada.
Voltar ao quarto tubo com a agulha bacteriológica e estriar na superfície. Este tubo deverá ser deixado por último pois o mesmo deverá receber um inóculo baixo, assim como, deverá se evitado arrastar nutrientes do meio original com a agulha, uma vez que estes nutrientes poderão dar reações falso-positivas. A tampa do tubo deverá permanecer frouxa.

Recomendações:

Todos esses meios possuem fórmulas adaptadas e rigorosamente controladas para fornecer leituras ótimas após incubação a 36ºC por 18 a 24 horas. Porém existem ocasiões especiais que podem requerer prazo adicional de tempo. Já nos kits miniaturizados, freqüentemente as provas podem fornecer uma leitura preliminar em um tempo inferior a 18 horas. Porém as mesmas deverão ser confirmadas após completada a incubação de 18-28h.
É adequado o trabalho com colônias recém isoladas (não superior a 24 horas).
Quando a cultura for conservada em geladeira, convém revitalizar a cepa realizando repiques em meios adequados.(ex.: caldo -> ágar -> KIT)
No caso dos kits miniaturizados o repique poderá ser feito tocando a colônia uma única vez e semeando nos 5 tubos, em ordem. A vedação com óleo mineral também é opcional. Entretanto recomenda-se que o microbiologista responsável valide esta metodologia.

Leitura e interpretação

O kit fornece leitura de triptofano desaminase, H₂S, glicose, gás, lisina, motilidade, indol, ornitina, citrato e rhamnose. A tactose deve ser lida nos meios de isolamento primário (Cled, MacConkey...)

Os resultados das provas são agrupadas em grupo de três, sendo que cada uma possui um valor numérico. A soma de cada grupo fornece ao final um número com quatro dígitos, que através de consulta em disquete ou Manual para Identificação de Enterobactérias Newprov, propicia classificação final com percentual e eventuais provas complementares para identificação segura do microorganismo em análise.

Relação dos componentes do produto:

Kit para Enterobactérias:

Para 10 determinações - Cód. 04-25

Cada kit contém:

10 tubos de Meio de EPM com 4 ml;

10 tubos de Meio de Lisina com 4 ml;

10 tubos de Meio de M.I.O. com 5 ml;

10 tubos de Meio de Citrato de Simmons com 3 ml;

10 tubos de Meio de Rhamnose com 4 ml.

Para 50 determinações - Cód. 04-26

Cada kit contém:

50 tubos de Meio de EPM com 4 ml;

50 tubos de Meio de Lisina com 4 ml;

50 tubos de Meio de M.I.O. com 5 ml;

50 tubos de Meio de Citrato de Simmons com 3 ml;

50 tubos de Meio de Rhamnose com 4 ml.

Mini Kit para Enterobactérias

Para 10 determinações - Cód. 11-02

Cada mini kit contém:

10 minitubos de Meio de EPM com 2 ml;

10 minitubos de Meio de Lisina com 2 ml;

10 minitubos de Meio de M.I.O. com 2 ml;

10 minitubos de Meio de Citrato de Simmons com 1 ml;

10 minitubos de Meio de Rhamnose com 2 ml.

Relação dos materiais e acessórios necessários à utilização do kit e que não são fornecidos com o produto:

Óleo mineral estéril;

Reativo de Kovacs;

Agulha bacteriológica;

Disquete ou Manual para Identificação de Enterobactérias.

Armazenagem e transporte:

Manter sob refrigeração entre 2 e 8ºC.

O produto não pode ser congelado, portanto conserve-o longe do congelador.

Verifique o prazo de validade na embalagem.

Nunca utilize produtos com validade vencida.

Precauções com o descarte seguro do produto:

Depois de utilizado, o produto poderá estar contaminado com microrganismos patogênicos, portanto deverá ser embalado em invólucro específico (sacos de lixo autoclaváveis ou outro material resistente), autoclavados por 15 minutos a 1 ATM e desprezados em lixo hospitalar.

OBSERVAÇÕES:

Para utilização do MINI KIT PARA ENTEROBACTÉRIAS, seguir as instruções gerais de uso. Neste caso as respostas bioquímicas poderão ser evidenciadas em prazo inferior a 18 horas.

Aos usuários sem experiência na utilização de MINI KIT PARA ENTEROBACTÉRIAS, recomenda-se primeiramente utilizar o kit convencional, pela maior facilidade na observação das reações bioquímicas, e depois passar a utilizar a linha miniaturizada.

Manual para kit E MINI-KIT de enterobactérias

Cód. 19-10 Þ Manual para Kit de Enterobactérias

Finalidade Þ Manual do Kit para Enterobactérias, contendo código numérico para identificação das Enterobactérias, com as percentagens da identificação.
Apresentação Þ Unitário. Também disponível em disquete ¾.

MEIOS DE CULTURA EM PÓ ALIQUOTIZADOS

LINHA CULT-PACK

Finalidade Þ Meios de cultura em pó, desidratados. Esta linha é constituída por diversos meios desidratados e já aliquotizados em sachês contendo uma quantidade de pó suficiente para o preparo de 1000 ml de meio. Apresenta diversas vantagens sobre os meios desidratados embalados em frascos convencionais:
O custo é mais acessível pois os sachês contêm algumas gramas de pó e não 500 g como os frascos convencionais;
Não há risco de haver hidratação do meio;
Pela quantidade de pó ser o suficiente para o preparo de um litro não há preocupação quanto ao prazo de validade do produto.
Não requer controle de qualidade da função do meio de cultura

Evita pesagens pois o pó já vem aliquotizado.

Apresentação: Sachês contendo uma quantidade variável de pó conforme o meio aliquotizado:

Cód. 21 - 01 - Ágar Bacteriológico (15 g)

Cód. 21 - 02 - Ágar Cled (36 g)

Cód. 21 - 03 - Ágar Entérico de Hektoen (76 g)

Cód. 21 - 04 - Ágar MacConkey (50 g)

Cód. 21 - 05 - Ágar Mueller-Hinton (38 g)

Cód. 21 - 06 - Ágar Sabouraud-Dextrose (65 g)

Cód. 21 - 07 - Ágar - SS - Salmonella-Shigella (60 g)Cód. 21 - 08 - Ágar Teague (EMB) (36g)

Cód. 21 - 09 - Ágar XLD (55g)

Cód. 21 - 10 - Base para Ágar Sangue (40 g)

Cód. 21 - 11 - Caldo BHI - Infuso de Cérebro e Coração (37 g)

Cód. 21 - 12 - Caldo Tioglicolato sem indicador (28,5 g)

Cód. 21 - 13 - Caldo Tríptico de Soja - TSB (30 g)

Validade = 24 meses

meios de isolamento para micobactérias

Cód. 04 - 28 Þ Meio de Lowenstein-Jensen

Finalidade Þ Meio de cultura destinado ao isolamento de Micobatérias, principalmente o Mycobacterium tuberculosis. É composto de asparagina, sulfato e citrato de magnésio, amido de batata, verde malaquita glicerol e gema de ovos selecionados. O material a ser incubado deve ser previamente tratado, visando a
descontaminação, já que este meio possui uma seletividade muito baixa.
Apresentação: Caixa com 8 tubos. Validade = 12 meses

Para FUNGOS E LEVEDURAS

Cód. 04 - 06 Þ Ágar Mycosel

Finalidade Þ Ágar seletivo utilizado em isolamentos de dermatófitos. Contém Cloranfenicol, destinado à inibição de bactérias sensíveis a este antimicrobiano que possam estar presentes no material. Pode inibir o desenvolvimento de fungos leveduriformes.
Apresentação: Caixa com 8 tubos. Validade = 10 meses

Cód. 04 - 08 Þ Ágar Sabourand Dextrose

Finalidade Þ Meio composto de peptona, dextrose e ágar, destinado ao isolamento de fungos e leveduras. É um meio que não possui inibidores. Para um melhor desempenho é recomendado o seu uso em conjunto com o Ágar Mycosel.
Apresentação: Caixa com 8 tubos. Validade = 10 meses

HEMOCULTURAS

isolamento de microrganismo do sangue é atualmente uma das mais importantes funções de laboratório de Microbiologia Clínica.
Pacientes que apresentam um aumento de pulsação e temperatura, ou calafrios, prostração e hipotensão, ainda a observação de febre prolongada leve e intermitente, associada a um sopro cardíaco, constituem indicações suspeitas de bacteremia.
A coleta do sangue do paciente e seu cultivo, o mais breve possível, contribui de maneira efetiva na orientação da terapia antimicrobiana e no estabelecimento do diagnóstico de septicemia.
Considerando a gravidade deste tipo de infecção, deve ser muito criteriosa a escolha de meios apropriados quanto à sua composição nutricional e atmosfera de incubação. A alta mortalidade por septicemias, podendo chegar a 40% em pacientes hospitalizados, vem ratificar a importância da hemocultura bem realizada.
Número de Amostras
Em pacientes com endocardite bacteriana a coleta de amostras tem sido geralmente de três hemoculturas. Nestes casos, as amostras devem ser obtidas em intervalos superiores a uma hora, dentro de um período de 24 horas.
Nas bacteremias intermitentes a coleta de três amostras de sangue nas 24 a 48 horas são recomendadas. A freqüência da coleta de amostra neste caso, está baseada na sintomatologia clínica do paciente e na urgência de administração de antimicrobianos. Entretanto recomenda-se intervalos de 30-60 minutos entre as coletas.
Pacientes que já receberam antibioticoterapia normalmente necessitam de 4 a 6 hemoculturas para o melhor isolamento.

Momento da Coleta

Deve-se coletar o sangue imediatamente antes de pico febril ou assim que iniciar o aumento da temperatura corpórea Este é o momento em que existe maior quantidade de germes circulantes. Não coletar no pico febril.

Volume de Amostras

Deve ser respeitada, na maioria das vezes, a quantidade de sangue de 1:10 em relação ao meio de cultura. Em pacientes em uso de altas doses de antibióticos eficazes, é melhor a recuperação de microrganismos se utilizarmos a proporção de 1:5 sangue/caldo.
Estas quantidades estão definidas em função da concentração de S.P.S. (Polianetol Sulfonato de Sódio) existente no caldo de hemocultura.
No HEMOPROV adulto utilize 5 ml de sangue, e no pediátrico 1 ml de sangue.

Técnica de Coleta

Lavar as mãos com sabão cirúrgico. Enxaguar e secar adequadamente.
Garrotear o braço do paciente e selecionar uma veia adequada. Esta área não deve ser mais tocada com os dedos.
Lavar a área de punção com sabão degermante.
Remover o sabão com álcool isopropílico ou etílico a 70%.
Desinfetar a área de punção com uma solução de iodo a 2% (álcool iodado a 2%). Deixar alguns minutos para a secagem e efetiva ação do detergente.
Coletar assepticamente as quantidades de sangue recomendadas (ex.: 10 ml em adultos), cuidando para que não hajam bolhas de ar na seringa.
Fazer uma assepsia prévia das tampas de HEMOPROV com uma solução de iodo a 2% (álcool iodado a 2%). Inocular em dois frascos a quantidade de sangue recomendada.

Incubação e Leitura

Recomendamos incubar os frascos a 35ºC. Um dos frascos deve ser aerado. Para tanto, introduzir assepticamente uma agulha com algodão previamente esterilizado e retirar em seguida.
A partir de 12 horas de incubação, observar qualquer evidência de crescimento de microrganismos (turvação, hemólise, coagulação ou gás).
Nestes casos, recomendamos bacterioscopia pelo método de Gram e a inoculação em ágar chocolate suplementado de preferência com uma tensão de
10% de CO₂.
Existem ocasiões em que se observa na coloração, presença microbiana em que não desenvolveu na placa acima citada, isto é particularmente verdadeiro nos frascos não ventilados. Nestes casos é necessário a inoculação em meios destinados ao isolamento de microrganismos anaeróbios, usando-se técnica para bactérias anaeróbias, ou na impossibilidade, relatar ao clínico o resultado do Gram do caldo de cultivo, explicando a possibilidade de tratar - se de flora anaeróbia.

Recomendação

Sub-cultivos cegos são recomendados de 6 a 24 horas após a incubação iniciar e também 48 horas após. O objetivo é recuperar determinados tipos de microrganismos que podem estar presentes nas amostras coletadas, e passar desapercebidos, por não turvarem o meio de cultura.

Este fato é válido principalmente quando se usa frascos não ventilados e quando microrganismos como Pseudomonas, meningococos, gonococos, hemofílos, estão presentes.

Interpretação

Na maioria dos episódios de bacteremia observa-se apenas o crescimento de um tipo de microrganismo. No entanto existem trabalhos que indicam mais de 18% de episódios polimicrobianos. Em razão deste fato e considerando a flora normalmente existente na pele, a assepsia deve ser rigorosa.
O isolamento de estafilococos coagulase negativa, difteróides e bacilos Gram positivos, são de difícil interpretação clínica, a não ser que ocorram em mais de uma amostra, ou quando o isolamento se refere a pacientes cateterizados, ou imunideficientes.
Recomendamos o armazenamento dos frascos de HEMOPROV a temperatura ambiente e ao abrigo da luz.

Cód. 07 - 01 Þ HEMOPROV I – TSB + SPS + CO₂ + vácuo (Adulto)

Finalidade Þ Caldo tríptico de soja acrescido de SPS (polianeto lsulfonato de sódio), com CO₂ e vácuo. É um caldo para crescimento amplo, que enriquece a maioria das bactérias inclusive anaeróbios. O SPS utilizado é um anticoagulante que inibe alguns antibióticos, complementos, b -lipoproteínas e a fagocitose in vitro. CO₂ e vácuo propiciam condições ótimas para o crescimento das bactérias.
Importante observar que devem ser colhidas no mínimo 3 amostras, sendo que 1 amostra deve ser aerada, visando o desenvolvimento de microrganismos aeróbios estritos, como por exemplo Pseudomonas sp e leveduras.
Apresentação: Caixa com 10 frascos de 45 ml. Também disponível em embalagem hospitalar (caixa com 100 frascos).
Validade = 24 meses.

Cód. 07 - 02 Þ HEMOPROV II – TSB + SPS + CO₂ + vácuo (Pediátrico)

Finalidade Þ Caldo tríptico de soja acrescido de SPS (polianeto lsulfonato de sódio), com CO₂ e vácuo. É um caldo para crescimento amplo, que enriquece a maioria das bactérias inclusive anaeróbios. O SPS utilizado é um anticoagulante que inibe alguns antibióticos, complementos, b -lipoproteínas e a fagocitose in vitro. CO₂ e vácuo propiciam condições ótimas para o crescimento das bactérias.
Importante observar que devem ser colhidas até 3 amostras, sendo que 1 amostra deve ser aerada, visando o desenvolvimento de microorganismos aeróbios estritos, como por exemplo Pseudomonas sp e leveduras.
Apresentação: Caixa com 10 frascos de 9 ml.Validade = 24 meses.

Cód. 07 - 04 Þ HEMOPROV III - BHI + PABA + SPS + CO₂ + VÁCUO (Adulto)

Finalidade Þ Possui BHI (Caldo Infusão de Cérebro e Coração) com adição de PABA (acido paraminobenzóico) destinado à inibição de sulfas que possam existir nas amostras de sangue. SPS é o anticoagulante já citado no Hemoprov I (cód.07-01) , tendo também CO₂ e vácuo já definidos anteriormente.
Apresentação: Caixa com 10 frascos de 45 ml. Validade = 24 meses.

Cód. 07 -05 Þ HEMOPROV IV - BHI + PABA + SPS + CO₂ + VÁCUO (Pediátrico)

Finalidade Þ Possui BHI (Caldo Infusão de Cérebro e Coração) com adição de PABA (acido paraminobenzóico) destinado à inibição de sulfas que possam existir nas amostras de sangue. SPS é o anticoagulante já citado no Hemoprov I (cód. 07-01), tendo também CO₂ e vácuo já definidos anteriormente.
Apresentação: Caixa com 10 frascos de 9 ml. Validade = 24 meses.

Cód. 07 - 06 Þ HEMOPROV V - Tioglicolato + SPS + CO₂ + vácuo (Adulto)

Finalidade Þ Frascos de hemocultura com tioglicolato, acrescido do mesmo anticoagulante, CO₂ e vácuo. Particularmente indicado quando se suspeita da presença de microrganismos anaeróbios e microaerófilos.
Apresentação : Caixa com 10 frascos de 45 ml. Validade = 24 meses.

Cód. 07 - 07 Þ HEMOPROV VI - Tioglicolato + SPS + CO₂ + vácuo (Pediátrico)

Finalidade Þ Frascos de hemocultura com tioglicolato, acrescido do mesmo anticoagulante, CO₂ e vácuo. Particularmente indicado quando se suspeita da presença de microorganismos anaeróbios e microaerófilos.
Apresentação: Caixa com 10 frascos de 9 ml. Validade = 24 meses.

Cód. 14 - 06 Þ SPS-PROV

Finalidade Þ Anticoagulante (solução a 5%) para hemocultura.
Apresentação: Frascos de 10 ml. Validade = 24 meses.

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